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dtot=(λ*n)/NA + n/(M*NA) * e
例：40.5um =（0.55um * 1）/0.1 + 1/(4*0.1)*14um (這里取中間值14um)
注：這里以4x物鏡為例
公式中：
dtot：景深
NA ：數(shù)值孔徑
M ：總放大率
λ： 光波波長, （通常λ=0.55um）
n : 試樣與物鏡之間介質(zhì)的折射率（空氣: n=1、油: n=1.515）
e : 可分辨的最小距離，檢測器被放置在顯微鏡物鏡的像面，其橫向放大率是 M（e一般是4um、5um、6um......24um）